分光光度计的基本原理扼要介绍

分光光度计选用一个能够发生多个波长的光源，通过系列分光设备，然后发生特定波长的光源，光源透过测验的样品后，部分光源被吸收，核算样品的吸光值，然后转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。

单色光辐射穿过被测物质溶液时，被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比，其联系如下式：

A=-log(I/I。)=-lgT=kLc

式中 :A 为吸光度;

I。为入射的单色光强度;

I 为透射的单色光强度;

T 为物质的透射率;

k 为摩尔吸收系数;

L 为被剖析物质的光程，即比色皿的边长

c 为物质的浓度

物质对光的选择性吸收波长，以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在必定条件下的吸收系数后可用相同条件将该供试品配成溶液，测定其吸收度,即可由上式核算出供试品中该物质的含量。在可见光区，除某些物质对光有吸收外，许多物质自身并没有吸收但可在必定条件下参加显色试剂或通过处理使其显色后再测定,故又称比色剖析。因为显色时影响呈色深浅的要素较多，且常运用单色光纯度较差的仪器，故测守时运用规范品或对照品一起操作。