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最新SPMA高效液相色谱规范解析

一、标准起草背景苯在各行业被广泛使用,制鞋和箱包工业中大量使用苯或含苯的溶剂和黏胶剂,在我国尚有此类企业存在空气苯严重超标的情况。长期以来,对职业苯接触者进行暴露评价一直采用作业场所的环境监测。近..

  一、规范起草布景

  苯在各行业被广泛运用,制鞋和箱包工业中很多运用苯或含苯的溶剂和黏胶剂,在我国尚有此类企业存在空气苯严峻超支的状况。长期以来,对工作苯触摸者进行露出点评一向选用作业场所的环境监测。近年来,发达国家逐渐选用生物监测技能检测苯触摸的内露出目标苯巯基尿酸(SPMA),并将生物监测与环境监测相结合,全面点评苯作业工人的个别触摸水平。我国至今没有展开对工作触摸苯的生物限值及其检测办法的研讨,拟定该规范有利于对苯作业者工作露出水平的进行客观点评。

  二、规范运用规模

  本规范规则了尿中苯巯基尿酸浓度的检测办法,适用于工作触摸苯工人尿中苯巯基尿酸浓度的测定。尿中苯巯基尿酸(SPMA)与苯触摸者存在杰出相关性,是低浓度苯触摸特异和灵敏的生物标志物。现在国外研讨机构首要选用高效液相色谱法(HPLC)、液质联用(LC-MS、LC-MS/MS)、气相色谱法(GC)、气质联用(GC-MS)和酶联免疫吸附试验(ELISA)等办法检测尿中SPMA。HPLC法是各国工作卫生机构进行生物监测的常用办法。现在国内HPLC仪根本遍及,利于其作为工作苯触摸尿中SPMA检测办法的运用。本法所用仪器在基层单位已遍及,办法前处理简略易操作,样品收集、运送、保存便利,色谱操作易于把握,因而本办法便于推广运用。

  三、规范拟定的办法和根据

  本办法原理是尿中苯巯基尿酸(S-phenylmercapturic acid, SPMA)经氯仿∶异丙醇(5∶1,v/v)液-液萃取后,经ODS柱别离,紫外检测器检测,以SPMA峰保存时刻定性,峰高或峰面积定量。该办法挑选乙腈-0.3%甲酸(25∶75,v/v)为活动相,0.3%甲酸可使SPMA色谱峰保存时刻短,并且出峰邻近没有杂质峰搅扰。对SPMA全离子峰(扫描规模:100-300 m/z)可见SPMA分子离子峰([M-H]—m/z238)和一个碎片峰(m/z109),其间[M-H]—m/z238为基峰,将其作为定量剖析检测的离子。该办法最低检测限为10µg/L;线性规模为10~320µg/L。运用该办法对55名低浓度苯作业者的现场研讨标明,个别接苯浓度的TWA规模为0.71~32.17mg/m3,尿中SPMA浓度规模为10~924µg/L,可满意10ppm以下苯触摸人群生物监测的需求,特别对我国苯作业场所工作触摸限值TWA =6mg/m3内的人群可进行有用生物监测与点评。

  本办法用于测定尿中SPMA不足之处是保存时刻较长,检测灵敏度较低,但仍可定量区别工作与非工作苯触摸。本办法选用氯仿∶异丙醇(5∶1,v/v)萃取,试验标明混合溶剂萃取效率高。活动相选用乙腈作为活动相A,乙腈-甲醇-三乙胺(磷酸调理PH)为活动相B,选用梯度洗脱以缩短剖析检测时刻。柱温箱温度设置在35℃时,尿样中样品峰周围的杂质峰对SPMA出峰的影响最小,色谱峰别离较彻底。办法挑选205nm波长作为检测波长,可确保在基线平稳的状态下,既下降布景搅扰、又进步检测的灵敏度。尿液PH对SPMA提取作用影响大,Paci[7]将尿样先加强酸后加碱液调理适合pH值后用有机溶剂提取,其机制是尿中SPMA前体在酸性条件下可水解为SPMA;试验中发现尿样pH在1~2时,SPMA的提取回收率较高。

  四、规范运用的阐明

  本办法样品进行前处理时,需求调理尿样使pH<2时,这时的SPMA的提取回收率较高。在试验过程中,在活动相B中,当调理三乙胺溶液的pH=2.16时,SPMA色谱峰的别离作用较好。将柱温箱的温度设置在35℃时,尿样中样品峰周围的杂质峰对SPMA出峰的影响最小。在低浓度苯触摸时吸烟或许存在影响,采样前一天触摸者应防止吸烟。需求留意的是,在中、高浓度的苯触摸时,班后反-反式粘糠酸(ttMA)与空气苯浓度的相关性优于苯巯基尿酸(SPMA)。主张在接苯浓度5ppm以下时可首选尿SPMA为生物监测目标,在5ppm-15ppm首选尿ttMA,在15ppm以上时两项目标均可挑选。

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